MPN

25-june 2010

MPN ( Most Probable Number / JPT = Jumlah Perkiraan Terdekat)

untuk pemeriksaan minuman.
sample : minuman
media : LB 1, LB 2, BGLB, EMB,INVIC
alat : pipet 10 ml steril, pipet 1 ml steril.tabung reaksi, rak tabung reaksi.tabung durham.

prosedur hari pertama :
1. Membuat LB 1 sebanyak 2 tabung masing-masing 10 ml.diberi label tabung LB1a dan LB1b
2. Membuat LB 2 sebanyak 5 tabung masing-masing 10 ml.
3. Memasukkan 0,1 ml sampel pada tabung LB1a dan 1 ml samppel pada tabung LB1b.
Menghomogenkan.
4. Memasukkan 10 ml sampel pada tabung LB 2.Menghomogenkan.
5. Menginkubasi selama 1 x 24 jam pada suhu 37 derajad celcius (dalam inkubator).
6. Melihat hasilnya.
hasil positive : timbul gas/gelembung pada tabung durham
hasil negative : tidak timbul gas pada tabung durham.

prosedur hari kedua :
1. Membuat BGLB sebanyak tabung yang positive pada pemeriksaan hari pertama.
2. Menginokulasikan ke BGLB dari LB yang positive.
3. Menginkubasikan selama 1 x 24 jam pada suhu 37 derajad celcius.
4. Melihat hasilnya.
hasil positive : ada gas pada tabung durham.
hasil negative : tidak ada gas pada tabung durham.

prosedur hari ke tiga :
Dari BGLB yang posotif dengan konsentrasi sampel yang terkecil diinokulasikan ke media EMB.
Menginkubasi 37 derajad celcius selama 24 jam.

prosedur hari ke empat :
Dari EMB yang posotif akan ditunjukkan dengan koloni berwarna hijau metalic sheen..
Diinokulasikan ke media IMVC (indol, Mr, Vp, dan simon citrate)
Menginkubasi selama 24 jam 37 derajad celcius.

prosedur hari terakhir :
Mereaksikan reagen MR pada media MR sebanyak 3 tetes. Mereaksikan reagen kovac pada media indol sebanyak 3 tetes. Mereaksikan reagen VP pada media VP.
Bila positif akan terbentuk cincin merah fanta.